競爭性抑制劑通常是酶的類似底物或反應生成物。抑制劑與酶結合部位與底物與酶結合的部位相同。隨著抑制劑濃度的增加，抑制作用也隨之增強，但增加底物濃度可以降低抑制的程度。動力學參數的典型例子是丙二酸對琥珀酸脫氫酶的競爭性抑制，以及磺胺類藥物對二氫葉酸合成酶的競爭性抑制（底物分別為琥珀酸和對氨基苯甲酸）。競爭性抑制作用是指抑制劑與底物爭奪酶的活性中心結合位點，從而干擾酶與底物的結合，降低酶的催化活性。
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